大肠杆菌是实验室最常用的革兰氏阴性菌原核表达体系。革兰氏阴性菌的细胞壁由内外两层脂双层细胞膜夹杂一层肽聚糖组成。肽聚糖的糖链部分由高度重复二糖单元构成（N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸以beta-1,4糖苷键连接），肽聚糖的肽段部分通常是通过丙氨酸的氨基和胞壁酸的羧基形成酰胺键，不同肽段的侧链之间再形成直接的交联。

常见的大肠杆菌裂解方法有两大类，两类方法都是通过破坏细胞壁的内外脂双层膜以及肽聚糖的完整结构，实现细菌的裂解。1）物理方法，包括了超声法、均质法、研磨法、冻融法。物理方法的优势在于不引入杂质成分、成本低、效率高。超声破碎法是当前实验室中裂菌（0.5-5L培养物）的首选；工业级别的大体积高密度发酵菌体通常使用均质破碎方法，此方法可以一小时处理10L以上菌体而无需耗材。研磨法和冻融法由于处理通量和效率的限制，往往只在特定的实验中使用。2）化学方法，包括了有机溶剂法、酸碱裂菌法、溶菌酶消化法。化学方法的优势在于不受体积的限制，可以处理微升级别样品。其中酸碱裂菌法速度快、效率高，但条件剧烈不适合维持蛋白的天然构象，此方法在质粒抽提中运用最为广泛。有机溶剂法也易造成蛋白的失活，仅适合特定应用方向。

飞刀TM快速裂菌试剂盒（CutE.coli Lysis Kit）可用于大肠杆菌(E.coli)等革兰氏阴性菌的快速、温和、低成本裂解，释放胞内蛋白以及消化核酸。产品操作简单、重复性好，可有效降低裂菌上清粘度，保障后续蛋白纯化。飞刀TM快速裂菌试剂盒的A液含有复合溶菌酶，可以在细菌细胞壁的不同位置高效切开裂口，实现胞内蛋白的完美释放。菌体破裂以后，胞内的蛋白质、小分子、DNA、RNA都会释放到胞外，此时需要将核酸充分打断，否则带有强负电性的核酸将和目的蛋白以及杂质相互作用，导致纯化的产物纯度降低，并堵塞纯化填料，降低柱效并影响填料的使用寿命。在超声和均质破菌方法中，物理的剪切力无差别的打断肽聚糖、核酸以及蛋白质，为降低样品粘度，通常要多次超声或者均质。过度的物理作用不仅会造成特定的目的蛋白断裂，导致纯化产物出现降解条带，也会因为热量的作用造成蛋白质的活力丧失。飞刀TM快速裂菌试剂盒的B组分为重组超级核酸酶，它可以快速切断DNA、RNA使之降解成100bp以下的小片段，同时不会影响目的蛋白的一级序列以及高级结构的完整。因此使用本试剂盒提取蛋白，不会造成目的蛋白的”额外“破坏，是一种温和、快速、高效的破菌方案。

下方图片展示的是超声裂菌和飞刀TM快速裂菌试剂盒裂菌的纯化对比结果：

产品主要用途：

多样本小量coli细菌的快速裂解，后续可接小量诱导表达的蛋白可溶性检测；

多样本中量coli细菌的快速裂解, 后续可接蛋白纯化、性质表征；

大量coli细菌的快速裂解，降低样品粘度，提高规模制备效率以及蛋白纯度；

其它革兰氏阴性菌的辅助裂菌。

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